解剖实验报告
蛙类坐骨神经–腓肠肌标本制备、 不同频率刺激对肌肉收缩的影响
一.目的要求
掌握蛙类双毁髓的试验方法;
掌握坐骨神经—腓肠肌标本标本的制作方法;
观察不同刺激频率对骨骼肌收缩形式的影响。二.基本原理
蛙类动物的某些基本活动, 如神经的生物电活动、 肌肉收缩等与哺
乳动物相似。其离体组时所需的生活条件比较简单, 易于控制和掌握,而且动物来源丰富, 因此在生理实验中常用蛙类的坐骨神经—腓肠肌标本和坐骨神经标本来观察组织的兴奋性、 刺激与反应的规律以及骨骼肌收缩的特点等。
肌肉受到一次阈上刺激而产生的一次收缩为单收缩,其过程可分为三个时相,即潜伏期、缩短期和舒张期。肌肉受到连续的阈上刺激时, 如果刺激间隔小于单收缩的过程, 相邻两单收缩的时相会出现融合, 表现为强直收缩现象。
如果表现为每次收缩的开始发生在上次收缩的缩短期, 称完全强直收缩, 如果表现为每次收缩的开始发生在上次收缩的舒张期, 称不完全强直收缩。
使用生物信号采集处理系统,可以观察到腓肠肌收缩的情况。
三.实验材料
实验动物:健康青蛙一只;
实验器材和药品:蛙类手术器械一套,张力换能器,肌槽,刺激电
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极,铁架台,生物信号采集处理系统,微机,任氏剂。
四.实验步骤
捣毁蟾蜍脑脊髓:取蟾蜍一只,用自来水冲洗干净。左手握蛙,用食指下压头部前端,拇指按压背部,使头前俯。中指与无名指夹其前肢,无名指与小指夹其后肢,使整个躯干做最大屈曲。把探针自枕骨大孔处垂直刺入,到达椎管,即将探针改变方向刺入颅腔,向各侧不断搅动,彻底捣毁脑组织;再将探针原路退出,刺向尾侧,捻动探针使其逐渐刺入整个椎管内, 完全彻底捣毁脊髓。
脊髓破坏完全的标志是:下颌呼吸运动消失,反射消失,四肢松软。
剪除躯干上部和内脏,去皮,制备下肢标本: 用粗剪刀在骶髂关节前 1 厘米处剪断脊柱,握住蟾蜍下肢,沿躯干两侧剪开腹壁。此时躯干上部及内脏即全部下垂。
剪除全部躯干及内脏组织。
剪去肛周皮肤;用圆头镊子夹住脊柱,注意不要碰到坐骨神经,捏住皮肤边缘,逐步向下牵拉剥离皮肤。
将全部皮肤剥除后, 把标本置于盛有任氏液的培养皿中。
2.1.1.3 洗净双手和用过的全部手术器械。
分离两下肢: 避开坐骨神经,用粗剪刀从背侧剪去骶骨,然后沿中线将脊柱剪成左右两半, 再从耻骨联合中央剪开, 将已分离的标本浸入盛有任氏液的培养皿中。
2.1.1.5 取出一下肢,用蛙钉固定于蛙板上,固定时要注意,坐骨神经和腓肠肌朝上。先用玻璃分针沿脊柱侧游离坐骨神经腹腔部, 然后循股二头肌和半膜肌之间的坐骨神经沟,纵向分离暴露坐骨神经之大腿部分直至腘窝,在分离过程中,把神经周围的结缔组织去除干净, 并把神经的细小分支剪断, 但要注意
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不要用金属器械碰触神经, 也不要对神经过度牵拉。
实验期间应不断滴加任氏液使神经保持湿润。
用玻璃分针游离腓肠肌,并在下面穿线,在跟腱处打结。在结扎线
的下方剪断跟腱, 在膝关节处把除腓肠肌外的小腿其他部分剪除。 注
意保持完整的腓肠肌。 2.1.1.7 用棉线在靠近脊柱的位置结扎坐骨
神经,并在结扎线的上方剪断神经, 用眼科剪剪断坐骨神经的全部支。
从腘窝处开始剪掉大腿所有的肉, 尽量把股骨刮干净, 在膝关节上至
少 1cm处剪去上段股骨。将标本浸入任氏剂的培养皿中。
实验装置与仪器连接: 1. 将标本股骨残端固定在肌槽上的小孔内;
将结扎腓肠肌肌腱的棉线与张力换能器连接, 调节棉线的松紧, 要与桌面垂直; 3. 将神经置于肌槽的刺激电极上, 用任氏剂保持标本湿润;4. 刺激电极插入微机上的刺激输入孔; 5. 张力换能器与微机相应通道相连。
打开电脑,进入生物信号采集处理系统, 在菜单栏选择“实验项目” -------- 》“神经肌肉” ------- 》“刺激强度与反应的关系实验模块”点击开始,调节刺激参数,使频率自动逐渐递增,串间隔为 2. 连续
记录不同频率时的肌肉收缩曲线。
五.结果与分析
不同频率刺激对肌肉收缩的影响:串间隔为
2,
频率增量为
1 时的
张力变化可见单收缩、不完全强直收缩、完全强直收缩。
分析:刺激强度到达阈刺激时腓肠肌开始收缩, 在最大刺激收缩力
前随刺激强度增大而增大, 到达最大刺激强度后, 收缩力不发生明显
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改变;在最大刺激强度条件下,某较小频率使腓肠肌发生单收缩 ( 如图中第一次刺激 ) ,频率增大到,单收缩变为不完全强直收缩,频率继续增大,不完全强直收缩变为完全强制收缩。
不同的腓肠肌其阈刺激,最大刺激均存在差异; 其单收缩,不完全强直收缩和完全强直收缩所要频率也不尽相同。
六.实验总结
本次试验严格按照操作步骤进行, 所得实验结果较为理想, 很容易
观察到腓肠肌的单收缩、不完全强直收缩、完全强直收缩现象。在实
验的过程中,制备坐骨神经 - 腓肠肌标本是最繁琐的步骤,也是实验
成功的关键所在,期间,我们进行的比较缓慢,生怕弄错了哪一步,
一步步想原理、回忆老师是怎么说的,所幸的是我们最终成功了,得
到了较好的结果, 在这次的不断尝试和思考中, 很好地锻炼了我们的
动手能力和思维能力。
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